微透析采样技术(简称微透析)是一种活体细胞外液(ECF)生化物质采样分析技术。因其具有的微创性和取样的连续性,以及活体、原位取样，实时、在线检测等突出特点现已被广泛应用于脑组织各种病理生理现象的探索性实验和神经生物化学的监测。随着微透析的发展与改进，其应用领域已扩展至药理、药物代回收率也必定有所改变。

影响微透析探针回收率因素有很多，一般体外因素有:温度、PH值、待测物质的理化性质、扩散速度、探针的结构、灌注液的性质成分和速度、透析膜的物理性质、压力、探针与被测物质的反应。体内因素有:生物体本身的健康条件和生物节律、取样部位的生物学性质、药物的细胞吸收、主动转运、代谢速率、蛋白结合等。

1.温度在进行微透析体外实验时，应尽量模拟体内的微环境，实验环境与体内保持一致，使测得的回收率更为准确，实验表明，体外微透析试验的温度控制在37℃左右。

2.pH值不同的药物具有不同的pH值，只有在适宜的pH值下药物的溶解度最高，回收率也最大。Micha lowski等在评价微透析作为一项测定亲脂性药物从毫超微囊剂、毫微球剂型中的捕获效率和药物释放时，考察了影响微透析探针回收率的因素，结果发现随着pH值得不断增大，回收率得到了提高。Plock[等在体外微透析考察了万古霉素通过半透膜渗透性实验中发现，灌流液为林格氏液时，改变灌流液中万古霉素的浓度，回收率也相应有所变化，回收率呈现浓度依赖性。但将灌流液更换为pH7.4含50mM钾离子的磷酸盐缓冲溶液时，回收率的浓度依赖性消失。这可能是由于改变不同浓度的万古霉素的pH值，使其扩散系数发生变化的原因。

3.探针结构除了在上述探针的分类时提到的探针的种类,有时为了方便试验的操作,常对探针进行小小的改动,理论上讲,这样做将会改变探针的性能.例如Klimowicz"将磷酸缓冲液作为透析液、灌注液速度为1-15uL·min1,用5mgL的水杨酸或者双唑泰栓作为被测化合物对体外有与没有内部导线的微透析探针回收率进行了考察，HPLC检测透析液，结果显示透析探针在低流速时，没有明显区别，而在高流速灌流时(10-15uL-min')，有内部导线的探针与没有的探针的回收率有区别,但是其差别不大，并且，由于在体内试验中低流速灌流运用较多，而10-15L'min '的灌流速度所获得的回收率很低，所以应用很少。因此由于高流速灌流所带来的差别可以不予考虑。同样, Wisnicwski等发现,将同心圆探针内部插管的外半径增大50%，能够使u收率增加26%。

4.探针半透膜的材料微透析系统所用到的微透析膜是一种可对一定分子量物质进行截留的膜，膜的材料和大小对u收率也有影响。例如: Khramov等[在对一些疏水的三环类药物(丙咪嗪、地昔帕明、阿米替林、卡马西平、异丙嗪)的微透析相对回收率进行考察时发现。使用PC膜与使用铜纺和AN-69膜相比能够使回收率提高两倍。

5.探针植入的位置探针插入待测组织时，尽管损伤轻微，但仍可引起局部组织反应而影响灌注液中待测物质回收率。因此微透析中样品的采集应在至少灌流开始30—60min后才能进行，且尽可能使实验控制在24h内。

6.灌流速度灌流速度越慢，其相对回收率就相应的越高，即流速与相对回收率成反比。但是，Kjellstrom也曾报道，在检测白细胞三烯时，在流速低于1uL- min-'时，随着流速的降低回收率也下降。原因可能是由于白细胞三烯被半透膜所吸附。减小灌流速度虽然可以提高相对回收率，但是流速降低会使样品量减少，为了收集足够的样品以达到检测限，需要延长取样的时间间隔，因此降低了微透析的时间分辨性(temporal resoulation)，所以灌流的速度根据实验的需要而定。与细胞外液渗透压相等透析实验用的灌流液的灌流速度不超过5一10juL-min1，因为高流速并不能进一步增加绝对回收率，而且灌流液在压力下流出探针可能会引起组织损伤，并使透析膜两侧物质交换不能充分进行。灌流开始时，回收率很高，一般认为这是探头插入所引起的伤害性组织反应(如血脑屏障的局部破坏和细胞膜的破裂等)，大约经过30~60min后，回收率基本趋于稳定。因此，样品的采集至少要在灌流开始30~60 min后才能进行。

7.灌流液的成分药物扩散是依据跨膜浓度梯度，在扩散的过程中，膜两侧的浓度不断变化，因此，灌流液两侧的成分对回收率起着至关重要的作用

微透析是一种从生物活体内进行动态微量生化取样的新技术，能对大鼠、小鼠、兔子、羊、狗、猴等大小型动物的血液、脑、眼睛、心脏等组织区域进行微透析取样，具有活体连续取样、动态观察、定量分析、采样量小、组织损伤轻等特点，可运用于精神药物、生理学、药理学、生命胺分析、药物分析等研究领域。

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