+86-0731-84428665

新闻资讯

大鼠血液及肺组织的微透析采样技术
来源: | 作者:康森特生物科技 | 发布时间: 2024-06-07 | 642 次浏览 | 分享到:

采用微透析采样技术采集并测定大鼠血浆以及肺组织中的药物浓度,探索其药动学特点

微透析采样实验步骤

图片

图片

1、将大鼠进行麻醉、备皮与消毒。

2、大鼠气管切开插管,接通小动物呼吸机进行机械通气,将插管与气管固定并缝合皮肤。

3、肺探针植入:取出新的肺组织探针,将探针前端半透膜部分置于生理盐水中, 浸泡15-20分钟,使半透膜充分浸润。同时,定位右侧胸壁第5、6肋间(大约为剑突上1指半到2指),沿肋骨间隙斜向切开,用镊子钝性分离使肋骨充分暴露。通过止血钳离断第5肋骨,使之充分暴露右肺,无损伤镊轻轻提出右肺中叶,在脏层胸膜上作一小切口,沿切口向肺门方向斜向植入肺组织探针到肺组织内。轻轻复位肺叶,以4-0带线缝合将探针尾端固定于胸壁,防止脱落,逐层关闭胸腔)。PBS液灌注肺部探针,缓解创伤2h。

图片

图片

4、血管探针植入:取出新的血管探针,将探针前端半透膜部分置于生理盐水中,浸泡15—20分钟,使半透膜充分浸润。同时,沿右侧腹股沟斜行切开,用镊子钝性分离,使股动脉、股静脉及股神经分离,股静脉充分游离,带线结扎股静脉远端,股静脉近端用血管夹阻断,用剪刀剪取一段长约5mm的24号BD静脉留置针外层套管,将其一端剪成斜向尖锐口,用lml注射器针头在股静脉上作一小切口,将之前准备的套管用镊子沿切口植入股静脉中,血管夹松开后,管口可见血液流出,说明操作成功,再次夹上血管夹,血管探针顺套管放入股静脉中,松开血管夹,继续缓慢推送入下腔静脉,股静脉近心端带线结扎固定探针尾部。逐层关闭切口。PBS液灌注血管探针,缓解创伤2h。

5、探针相对回收率测定:采用反向透析法测算探针回收率。将1ug/mL被测物标准溶液,以2ul/min恒定速率灌注肺组织 以及血管探针。经过50min动态平衡期后,每间隔10min采样,收集5份透析液样品,用以计算探针回收率。灌注液药物浓度(Cperf)和透析液药物浓度(Cdial)用高效液相质谱法(HPLC—MS)测定,最终回收率为5份样品平均值。相对回收率Rdial计算公式:Rdial=(Cperf—Cdial)/Cperf

6、体内实际药物浓度(Cu)可由透析液浓度(Cm) 经公式Cu=Cm/Rdial转化获得。观察给药后6小时的大鼠血液及肺组织药动学变化。 

7、探针保存:将血管探针用蒸馏水灌注冲洗30min,冲洗结束后,将探针浸泡于肝素液中保存。


文章来源:

俞鑫. 微透析法研究盐酸氨溴索对莫西沙星在肺炎链球菌肺炎大鼠肺部的药动学影响[D]. 上海:第二军医大学,2015. DOI:10.7666/d.Y2813045.




想了解更多内容,获取相关咨询请联系 

 电   话:+86-0731-84428665

伍经理:+86-180 7516 6076

徐经理:+86-138 1744 2250

邮   箱:consentcs@163.com

官   网:www.consentcs.com