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肾血管性高血压小鼠模型中的氧气监测
来源: | 作者:康森特生物科技 | 发布时间: 2023-11-16 | 268 次浏览 | 分享到:

在这项研究中,我们使用了肾血管性高血压的小鼠模型,称为两肾一夹模型(2K1C)。在该模型中,一条肾动脉收缩,最终导致循环血管紧张素II增加和血压升高。VisiSens系统用于监测夹闭肾脏中的微血管灌注,并确保肾脏灌注减少但仍正常。使用VisiSens系统创建的氧气图像可以评估夹闭前后小鼠肾脏的灌注状态。这样就可以确定肾脏梗塞的动物,这些动物必须被排除在实验之外。


材料与方法

选用4 ~ 5周龄体重约20 g的雄性C57BL/6 小鼠。小鼠用戊巴比妥钠(50mg / kg)麻醉,通过吸入异氟醚维持。于大鼠左侧腹部肾脏位置行纵向切口,钝性分离暴露肾脏,分离出肾动脉,用不锈钢U型夹(见图1)环绕左肾主动脉,夹紧,造成左肾动脉狭窄,右肾不触及,复位肾脏,检查有无完全缺血,并用氧传感器箔(SF-RPSu4)覆盖。假手术组动物被用作对照。

为了固定VisiSens™探测器单元DU01,制作了一个支架,该支架首先应用于手术台上(见图2 A),随后将其固定在手术显微镜旁边(见图2 B)。通过这种设置,我们能够拍摄肾动脉夹闭前后肾脏微血管形成的氧气图像。

图1:用于收缩肾动脉的不锈钢U型夹(尺寸3 x 2 x 1 mm ,带有 2 mm 长的间隙),夹子开口的宽度为 0.127 毫米。

图2:微血管灌注监测装置:将氧传感器箔放置在小鼠肾脏上,VisiSens™检测器单元固定在传感器箔上方的支架上,用于氧气图像记录(A)。VisiSens™检测器单元固定在手术显微镜(B)旁边



小鼠肾脏的氧成像

使用VisiSens™系统,我们能够拍摄处理过的小鼠肾脏的氧气图像。图 3 中记录的图片显示了夹闭和肾动脉收缩前的微血管灌注情况。将封堵器放置在动脉上后,可以检测到灌注明显减少,表现为肾组织中较低的氧浓度(图4)。监测夹闭肾脏中的微血管灌注对于检查血流是否未完全闭塞很重要。图 5 显示了完全闭塞的肾脏的氧气图像。在那里,肾脏组织显示出极低的氧气浓度,表明它不再正确灌注。这只动物必须被排除在实验之外。夹紧4周后,两肾一夹高血压小鼠的血压比假手术对照组高出约20 mmHg。

图3:肾动脉结扎前拍摄的氧气图像;该图像显示了正确灌注的肾脏组织中的高氧含量(用黄色表示)。

图4:放置封堵器后小鼠肾脏的氧图像;可以观察到组织中的氧气水平略有降低。

图5:小鼠肾脏的完全闭塞;组织不再提供氧气,在氧气图像中清晰显示。


结论

我们发现VisiSens™适用于体内分析实体器官(肾脏、肝脏、皮肤)的微循环,但是在不规则形状的表面上使用传感器箔时存在一些局限性。氧气成像系统可以监测微循环和氧气供应,并用它来检查感兴趣器官的状况,从而可以决定是否继续在相应的动物身上进行实验。

实验来源:

Zoltán Varga
Cardiovascular Research Group, Department of Biochemistry, University of Szeged, Hungary







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